临床医学检验技术初级（师）临床免疫学及检验-试卷3 21页

临床医学检验技术初级【师】临床免疫学及检验-试 卷 3 (总分：74 分，做题时间：90 分钟) 一、 A2 型题(总题数：1，score:2 分) 1.实验：将痰液直接涂在载玻片上干燥固定，将荧光 标记的兔抗结核杆菌抗体滴加到标本表面，37℃温育 1 小时，洗片晾干，荧光显微镜观察可见着色的杆 菌。此方法为 【score:2 分】 【A】间接法 【B】直接法 【此项为本题正确答案】 【C】夹心法 【D】补体结合法 【E】双标记法 本题思路：免疫荧光直接法是用特异荧光抗体直接滴 加于标本上，使之与抗原发生特异性结合，是用荧光 抗体染色技术直接检测抗原的方法。 二、 B1 型题(总题数：2，score:16 分) A 直接法 B 间接法 C 夹心法 D 补体结合法 E 双标记 法【score:8 分】 (1).用 FITC 和 RB200 标记不同的抗体，对同一标本 做荧光染色为【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【E】 【此项为本题正确答案】 本题思路： (2).用特异荧光抗体滴加在标本上，与抗原发生特异 性结合的是【score:2 分】 【A】 【此项为本题正确答案】 【B】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (3).实验中由针对抗原的第一抗体和用荧光标记针对 第一抗体的第二抗体相继作用的是【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【E】 【此项为本题正确答案】 本题思路： (4).在抗原和抗体反应时加入豚鼠血清，用荧光标记 的抗补体抗体示踪的是【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【此项为本题正确答案】 【E】 本题思路：直接法是用特异荧光抗体直接滴加在标本 上使之与抗原发生特异性结合的方法；间接法由针对 抗原的第一抗体和用荧光标记针对第一抗体的第二抗 体相继作用的方法；补体结合法是在抗原和抗体反应 时加入豚鼠血清，用荧光标记的抗补体抗体示踪的方 法；双标记法是用 FITC 和 RB200 标记不同的抗体， 对同一标本做荧光染色，同时可见到橙红和黄绿两种 荧光色彩的方法。 A 藻红蛋白 B 四甲基异硫氰酸罗丹明 C 四乙基罗丹明 D 异硫氰酸荧光素 E 亮绿【score:8 分】 (1).呈现橙红色荧光的是【score:2 分】 【A】 【B】 【此项为本题正确答案】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (2).呈现明亮黄绿色荧光的是【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【此项为本题正确答案】 【E】 本题思路： (3).呈现明亮橙色荧光的是【score:2 分】 【A】 【此项为本题正确答案】 【B】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (4).呈现橘红色荧光的是【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【此项为本题正确答案】 【D】 【E】 本题思路： 三、 A1 型题(总题数：28，score:56 分) 2.荧光色素中呈现明亮黄绿色荧光的是 【score:2 分】 【A】藻红蛋白 【B】四甲基异硫氰酸罗丹明 【C】四乙基罗丹明 【D】异硫氰酸荧光素 【此项为本题正确答案】 【E】亮绿 本题思路：异硫氰酸荧光素呈明亮的黄绿色荧光；四 乙基罗丹明呈橘红色荧光；四甲基异硫氰酸罗丹明呈 橙红色荧光；藻红蛋白呈明亮的橙色荧光。 3.下述间接法描述不确切的是 【score:2 分】 【A】第一抗体为针对抗原的特异性抗体 【B】第二抗体为荧光标记抗体，是针对一抗的抗 抗体 【C】可用于检测抗原，也可用于检测抗体 【D】操作简便，特异性高 【此项为本题正确答 案】 【E】可以用于多种抗体的检测 本题思路：直接免疫荧光法具有操作简单、时程短、 特异性高的优点。 4.下列何种方法的灵敏度最高 【score:2 分】 【A】荧光法 【B】磷光法 【C】分光光度法 【D】比浊法 【E】化学发光法 【此项为本题正确答案】 本题思路：化学发光法是将发光系统与免疫反应相结 合，以检测抗原或抗体的方法，它既具有免疫反应的 特异性，更兼具有发光反应的高敏感性。 5.目前公认的最有效的检测抗核抗体的方法 【score:2 分】 【A】EUSA 【B】放射免疫技术 【C】直接荧光法 【D】间接荧光法 【此项为本题正确答案】 【E】补体法 本题思路：由于抗核抗体(ANA)的复杂性及多样性， 故测定方法繁多。目前 ANA 常用的方法有免疫荧光 法、放射免疫法、EIJSA、免疫双扩散、对流免疫电 泳及免疫印迹技术等。常用间接免疫荧光法 (indirect immunofluorescence，IIF)作为总的 ANA 筛选试验。 6.作为荧光抗体标记的荧光素必须具备的条件中，哪 项与提高观察效果有关 【score:2 分】 【A】必须具有化学上的活性基团能与蛋白稳定结 合 【B】性质稳定不会影响抗体活性 【C】荧光效率高，荧光与背景组织色泽对比鲜 明 【此项为本题正确答案】 【D】与蛋白质结合的方法简便迅速 【E】与蛋白质的结合物稳定 本题思路：用于标记抗体的荧光素应符合一系列的要 求，其中为了观察方便荧光色泽与背景应当对比鲜 明。 7.荧光免疫技术中，间接法中所使用的第二抗体可以 是 【score:2 分】 【A】抗种属特异性 IgA 荧光抗体 【B】抗种属特异性 IgG 荧光抗体 【C】抗种属特异性 IgM 荧光抗体 【D】以上都正确 【此项为本题正确答案】 【E】以上都不正确 本题思路：间接法中所使用的第二抗体是针对第一抗 体的抗抗体，可以是抗种属特异性 IgA、lgG、IgM 抗 体。 8.实验本身即可避免内源性非特异性荧光干扰的检测 方法为 【score:2 分】 【A】时间分辨荧光免疫测定 【此项为本题正确 答案】 【B】荧光偏振免疫测定 【C】荧光酶免疫测定 【D】直接荧光抗体染色法 【E】间接荧光抗体染色法 本题思路：时间分辨荧光免疫测定利用荧光寿命较长 的镧系元素，延长荧光测量时间，待寿命短的自然本 底荧光完全衰退后再行测定，从而有效地消除非特异 性荧光。 9.下列描述不正确的有 【score:2 分】 【A】荧光免疫技术不宜做培养细胞染色 【B】可对标本切片中组织或细胞表面抗原进行定 量和定位 【此项为本题正确答案】 【C】其主要步骤为标本制作、荧光抗体染色、荧 光显微镜检查 【D】标本的制作直接影响检测结果，是成功的关 键步骤 【E】荧光免疫技术不宜做组织细胞染色 本题思路：免疫荧光技术可以定性和定位，不能定 量。 10.免疫荧光技术的基本原理是 【score:2 分】 【A】将特异性抗体标记上荧光检测抗原 【B】将特异性抗原标记上荧光检测抗体 【C】将特异性抗体标记上荧光检测抗原或抗 体 【此项为本题正确答案】 【D】将特异性抗原标记上荧光检测抗原或抗体 【E】以上都不对 本题思路：免疫荧光技术中，直接法可以用于检测抗 原，而间接法除了可以检测抗原外，还可以检测抗 体，如抗核抗体的检测。 11.下列哪项方法不属于免疫荧光细胞化学 【score:2 分】 【A】直接法 【B】夹心法 【C】间接法 【D】补体法 【E】捕获法 【此项为本题正确答案】 本题思路：用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内 抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织) 化学技术。免疫荧光细胞化学分直接法、夹心法、间 接法和补体法。 12.FITC 在紫外光激发下，所产生的荧光为 【score:2 分】 【A】灰蓝色 【B】黄绿色 【此项为本题正确答案】 【C】橙色 【D】橙红色 【E】黄色 本题思路： 13.波长 200—400nm 的光称为 【score:2 分】 【A】红外光 【B】可见光 【C】紫外光 【此项为本题正确答案】 【D】无线电波 【E】微波 本题思路：紫外光的波长范围是 200—400 nm。 14.荧光寿命是指 【score:2 分】 【A】荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧光 随时间而衰减到一定程度所用的时间 【此项为本题 正确答案】 【B】非荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧 光随时间而衰减到一定程度所用的时间 【C】荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧光 随时间而增强到一定程度所用的时间 【D】非荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧 光随时间而增强到一定程度所用的时间 【E】以上都不是 本题思路：荧光寿命是指荧光物质被激发产生荧光后 随时间衰减到一定程度所用的时间。 15.荧光抗体染色技术中，特异性最高，非特异性染 色最低的方法是 【score:2 分】 【A】直接法 【此项为本题正确答案】 【B】间接法 【C】补体结合法 【D】双标记法 【E】电泳法 本题思路：荧光抗体染色技术中，直接法的特异性最 高，非特异性荧光染色因素少。 16.荧光抗体试验所没有的类型是 【score:2 分】 【A】直接法 【B】间接法 【C】补体结合法 【D】间接抑制法 【此项为本题正确答案】 【E】双标记法 本题思路：免疫荧光显微技术实验的类型包括直接 法、间接法、补体结合法和双标记法。 17.在荧光素标记抗体技术中，荧光素的抗体之间的 结合是靠 【score:2 分】 【A】范德华力 【B】氢键 【C】离子键 【D】共价键 【此项为本题正确答案】 【E】静电引力 本题思路：作为标记的荧光素应具有能与蛋白质分子 形成共价键的化学基团，与蛋白质结合后不易解离。 18.用于标记抗体的荧光素应符合下列要求，除外 【score:2 分】 【A】与蛋白质分子形成离子键 【此项为本题正 确答案】 【B】荧光效率高，与蛋白结合后仍能保持较高的 荧光效率 【C】荧光色泽与背景组织色泽对比鲜明 【D】与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的理化性 质 【E】与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的免疫学 性质 本题思路：许多物质都可产生荧光现象，但并非都可 用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为 染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光 染料。 19.温度对荧光分析影响的正确描述是 【score:2 分】 【A】溶液温度降低，荧光效率增加，荧光强度增 加 【此项为本题正确答案】 【B】溶液温度升高，荧光效率不变，荧光强度不 变 【C】溶液温度降低，荧光效率不变，荧光强度不 变 【D】溶液温度升高自熄灭现象减少 【E】溶液温度升高，荧光效率增加，荧光强度增 加 本题思路：影响荧光强度的因素包括：①溶剂增大溶 剂的极性，将使荧光强度减弱；②荧光物质的浓度： 荧光物质浓度太高时，会发生自熄灭现象；③温度： 温度升高时荧光效率降低；④溶液的 pH 值改变也会 造成影响。 20.反应结束时，对照管的成色最强，此情况常见于 哪种 ELISA 【score:2 分】 【A】双抗体夹心法 ELISA 【B】竞争法 ELISA 【此项为本题正确答案】 【C】间接法 ELISA 【D】捕获法 ELISA 【E】ABS—EUSA 法 本题思路：竞争法 ELISA 的原理为标本中的抗体和一 定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量 越多，结合在固相上的酶标抗体愈少，因此阳性反应 成色浅于阴性反应。 21.下列对血清中酶活力的测定的描述哪一项是错误 的 【score:2 分】 【A】可测定产物生成量 【B】可测定底物消耗量 【C】需最适 pH 【D】需最适温度 【E】与底物浓度无关 【此项为本题正确答案】 本题思路：酶促反应中需要最适 pH、温度及过量的 底物，反应速度可用一定时间内产物生成量或底物消 耗量来反映。 22.HRP 酶促显色反应中的供氢体(DH 2 )习惯上是指 【score:2 分】 【A】底物 【此项为本题正确答案】 【B】过氧化氢 【C】HRP 分子中的辅基 【D】H 2 O 【E】抗体 本题思路：HRP 酶促显色反应中的供氢体(DH 2 )习惯 上是指底物，如邻苯二胺、四氨基联苯胺。 23.酶免疫技术中将抗原抗体包被后再用下列何种物 质进行封闭可以消除非特异性显色导致的本底偏高 【score:2 分】 【A】1％一 5％牛血清白蛋白 【此项为本题正确 答案】 【B】1％一 10％牛血清白蛋白 【C】10％牛血清白蛋白 【D】10％一 15％牛血清白蛋白 【E】15％一 25％牛血清白蛋白 本题思路：封闭采用的物质是 1％～5％牛血清白蛋 白。 24.酶免疫技术中的酶结合物是指 【score:2 分】 【A】酶标记抗原 【B】酶标记抗体 【C】酶标记抗原或抗体 【此项为本题正确答 案】 【D】结合在固相载体上的酶 【E】酶与底物的结合 本题思路：酶结合物是指用酶标记后的抗原或抗体。 25.酶免疫技术中最佳工作浓度的选定常采用 【score:2 分】 【A】抗原稀释法 【B】抗体稀释法 【C】酶标记物稀释法 【D】棋盘滴定法 【此项为本题正确答案】 【E】A+B 本题思路：最佳工作浓度的选择通常通过将抗体、抗 原作一系列的稀释，即棋盘滴定。 26.不影响酶活性测定的因素为 【score:2 分】 【A】底物浓度 【B】样品杯直径 【此项为本题正确答案】 【C】温度 【D】pH 值 【E】缓冲液的离子强度 本题思路：底物浓度、温度、pH 值、缓冲液的离子 强度均可影响酶促反应的速度。 27.酶免疫技术用于样品中物质的定量测定(EIA)是基 于 【score:2 分】 【A】酶标记物参与免疫反应 【B】酶催化免疫反应，复合物中酶活性与样品测 值呈正比 【C】含酶标记物的免疫复合物中的酶可催化底物 成色，其色泽与待测物量相关 【此项为本题正确答 案】 【D】固相化技术的应用，使结合和游离的酶标记 物能有效地分离 【E】酶与抗原或抗体的特异结合 本题思路：酶免疫技术是抗原或抗体的固相化及抗原 或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后，底物被酶催 化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直 接相关，故可根据成色的深浅进行定性或定量分析。 28.酶联免疫吸附试验(ELISA)中应用最多的底物是 【score:2 分】 【A】邻苯二胺(OPD) 【B】四甲基联苯胺(TMB) 【此项为本题正确答 案】 【C】ABTS 【D】对硝基苯磷酸酯(p-NPP) 【E】以上都不是 本题思路：邻苯二胺灵敏度高，比色方便，是 ELISA 中应用最早的底物，但稳定性差，反应过程需要避 光，还具有致癌性；四甲基联苯胺稳定性好，反应无 需避光，没有致突变作用，是目前应用最广泛的底 物，但是水溶性差。 29.一个亲和素分子可以结合几个生物素分子 【score:2 分】 【A】4 个 【此项为本题正确答案】 【B】5 个 【C】8 个 【D】12 个 【E】2 个 本题思路：亲和素由 4 个亚基组成，可以结合 4 个生 物素。