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- 2021-05-22 发布
2.2 动物细胞工程
2．2.1 动物细胞培养和核移植技术
理一理
判一判
1.动物细胞培养过程中，细胞可能发生癌变而具有无限增殖的
特点。(√)
2．在培养过程中通常要通入 5%的 CO2 以刺激细胞呼吸。(×)
3．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。
(×)
4．二倍体细胞的传代培养代数通常是无限的。(×)
5．经细胞核移植培育出的新个体只有一个亲本的遗传性状。
(×)
6．用于核移植的供体细胞一般都选用传代 10～50 代以内的
细胞。(×)
7．体细胞核移植过程中采用 MⅡ中期卵母细胞作为受体细
胞。(√)
8．选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动
物的成功率。(√)
悟一悟
1.选取幼龄动物的组织、器官作为材料的原因
动物细胞培养的原理是细胞增殖。动物细胞培养时，一般选
取幼龄动物的组织、器官，其细胞的分化程度较低，增殖能力强，
有丝分裂旺盛，容易培养。
2．将动物细胞分散成单个细胞培养的原因
分散成单个细胞后容易培养，细胞所需的营养容易供应，其
代谢废物容易排出。同时，分散成单个细胞培养，可使得在细胞
水平操作的其他技术得以实现。
3．原代培养和传代培养的区别
①原代培养：是细胞悬液第一次在瓶中培养，即在没有分瓶
培养之前的细胞培养。
②传代培养：是在细胞悬液培养一段时间后，分瓶再进行的
细胞培养。
4．细胞株和细胞系的区别
①细胞株：传代培养的细胞能传到 10～50 代，这样的传代细
胞称为细胞株。
②细胞系：传代培养的细胞在传到 50 代后，有部分细胞的遗
传物质发生了改变，获得不死性，这种具有癌变特点的细胞称为
细胞系。
5．动物体细胞核移植的原理是细胞核的全能性，而不是动物
细胞的全能性。因为动物体细胞的全能性受到限制，不能经培养
直接发育成完整个体，所以用体细胞核移植技术能够得到克隆动
物，说明动物体细胞的细胞核具有全能性。
6．供体和受体的选择
(1)供体：一般选用传代 10 代以内的细胞，因为 10 代以内的
细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传
基础。
(2)受体：选择 MⅡ期的卵母细胞，其原因是：
①卵母细胞的细胞质内存在激发细胞核全能性表达的物质。
②卵母细胞体积大，便于操作。
③卵母细胞内卵黄多，营养物质丰富。
感悟体会：
练一练
1.[浙江卷]下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )
A．连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型
B．某些癌细胞在合适的条件下能逆转为正常细胞
C．由多个祖细胞培养成的细胞群为一个克隆
D．未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状
解析：连续细胞系的细胞一般都经历了多次培养，其二倍体
核型发生了改变，A 错误。细胞癌变是原癌基因和抑癌基因突变
引起的基因突变具有不定向的特点，如果癌细胞在合适的条件下
发生基因突变，有可能使突变后的原癌基因或抑癌基因变成正常
的基因，使细胞失去癌细胞的特点，B 正确。一个克隆是指 1 个
细胞经培养形成的细胞群，多个祖细胞培养成的细胞群不是一个
克隆，C 错误。未经克隆化培养的细胞系是由多个能无限增殖细
胞增殖得到的，无限增殖的细胞遗传物质发生了改变，这种改变
可能是不相同的，不一定具有相同的性状，D 错误。
答案：B
2．[2016·全国卷Ⅱ]下图表示通过核移植等技术获得某种克隆
哺乳动物(二倍体)的流程。
回答下列问题：
(1)图中 A 表示正常细胞核，染色体数为 2n，则其性染色体的
组成可为________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵
母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用________________
的方法。②代表的过程是________________。
(2)经过多次传代后，供体细胞中________的稳定性会降低，
因此，选材时必须关注传代次数。
(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物
质 的 角 度 分 析 其 原 因 是
________________________________________________________
________________。
(4)与克隆羊“多莉(利)”培育成功一样，其他克隆动物的成功
获得也证明了________________。
解析：(1)由题意可知，该动物体的性染色体组成为 XX 或 XY，
过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时
期再进行，去核时常采用显微操作去核法，②代表的过程是胚胎
移植。(2)动物细胞培养时，多次传代后，供体细胞遗传物质稳定
性会降低，故选材时必须注意传代次数。(3)克隆动物与供体动物
性状不完全相同，从遗传物质的角度来说，是因为卵母细胞的细
胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响。(4)克隆动物证
明了已经分化的动物体细胞细胞核具有全能性。
答案：(1)XX 或 XY 显微操作(去核法) 胚胎移植
(2)遗传物质
(3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生
影响
(4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性
考点一 动物细胞培养
1.[2019·河北高二期末]动物细胞培养中将组织细胞分散成单
个细胞常用的酶是( )
A．胰蛋白酶 B．胃蛋白酶
C．纤维素酶 D．果胶酶
解析：动物细胞培养中常用胰蛋白酶破坏细胞与细胞之间的
胶原纤维，将组织细胞分散成单个细胞。
答案：A
2．[2019·陕西省黄陵县中学高二期中]贴壁细胞的分裂方式属
于( )
A．无丝分裂 B．有丝分裂
C．减数分裂 D．增殖
解析：动物细胞培养过程中，细胞具有贴壁生长的特点，此
时细胞的分裂方式为有丝分裂。
答案：B
3．[2019·河北高二期末]动物细胞培养所处的气体环境一般是
( )
A．95%的 O2＋5%的 CO2 B．95%的空气＋5%的 CO2
C．5%的 O2＋95%的 CO2 D．95%的空气＋5%的 O2
解析：动物细胞培养所处的气体环境一般是 95%的空气＋5%
的 CO2,95%空气中的氧气可以满足细胞有氧呼吸的需要，5%的
CO2 可以维持培养液一定的 pH。
答案：B
4．[2019·辽源市田家炳高级中学高二期末]用动植物成体的体
细胞进行离体培养，下列叙述正确的是( )
A．都需要用含 95%空气加 5%CO2 的混合气体的培养箱
B．都需要用液体培养基
C．都要在无菌条件下进行
D．都可体现细胞的全能性
解析：动物细胞培养需要用 95%空气加 5%CO2 的混合气体培
养箱，但植物组织培养不需要用该条件 CO2 的混合气体培养箱，A
错误；动物细胞培养需用液体培养基，而植物组织培养可用固体
培养基，B 错误；动、植物细胞培养都要在严格的无菌条件下进
行，C 正确；植物细胞培养能体现细胞的全能性，而动物细胞培
养的原理是细胞增殖，不能体现全能性，D 错误。
答案：C
5．[2019·北京高二期末]下列关于动物细胞培养的叙述，正确
的是( )
A．因动物细胞具有接触抑制特性，可在培养瓶壁上出现多层
细胞
B．原代培养过程中大多数细胞的基因型会发生改变
C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
D．培养液中加入抗生素以防培养过程的污染
解析：除癌细胞外，细胞一般都为贴壁生长，且当贴壁细胞
分裂到表面相互接触时，因为细胞的接触抑制就会停止分裂增殖，
从而无法形成多层细胞，A 错误；克隆培养法即细胞培养过程中，
细胞进行的是有丝分裂，所以培养出来的多数细胞基因型相同，
只有少数细胞可能在培养过程中遗传物质改变，B 错误；一般来
说二倍体细胞传代培养过程中一般传至 10 代后就不易传下去了，
到 10～50 代左右，增殖会逐渐减缓，甚至停止，继续培养时，细
胞的细胞核型可能会发生变化，在保持二倍体核型的条件下，传
代培养的次数不可能达到无限次，C 错误；在进行动物细胞培养
液时，为了防止培养过程被细菌污染，可以在培养液中添加抗生
素，D 正确。
答案：D
6．[2019·黑龙江哈尔滨市第六中学校高二月考]用于动物细胞
培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或
组织，其主要原因是这样的组织或细胞( )
A．容易产生各种变异 B．具有更高的全能性
C．取材十分方便 D．分裂增殖的能力强
解析：动物细胞培养时，常选择幼龄的组织器官，因为这些
细胞分化程度低，分裂能力强。综上所述，A、B、C 不符合题意，
D 符合题意。
答案：D
考点二 动物体细胞核移植技术和克隆动物
7.[2019·福建高二期中]对哺乳动物进行克隆，细胞核供体细胞
不能是( )
A．乳腺细胞 B．卵细胞
C．胃腺细胞 D．胚胎细胞
解析：分析题意知，乳腺细胞、胃腺细胞、胚胎细胞均含有
该种生物的全部染色体，而卵细胞只含有该物种一半的染色体。
答案：B
8．[2019·天津高三期中]从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注
入到母羊乙的去核卵细胞中，融合后的细胞经卵裂可形成早期胚
胎，再植入另一只母羊丙的子宫内发育，生出的小羊大多数性状
( )
A．像甲 B．像乙
C．像丙 D．难以预测
解析：生物的性状遗传可以分为由细胞核内 DNA 控制的细胞
核遗传(主要)和由细胞质基因控制的细胞质遗传。经该过程出生的
小羊的遗传物质大部分来自提供核的亲本，少部分来自提供细胞
质的亲本，故小羊大多数性状像甲(细胞核遗传)，少数性状像乙(细
胞质遗传)，一般不会出现像丙的性状。
答案：A
9．[2019·广东佛山一中高二期中]用于核移植的供体细胞一般
都选用( )
A．受精卵
B．传代 10 代以内的细胞
C．传代 10～50 代以内的细胞
D．处于减数分裂第二次分裂中期的卵母细胞
解析：核移植的供体细胞是体细胞，A 错误；正常细胞在传
代 10 代以内时能保持细胞正常的二倍体核型，适宜用于核移植的
供体细胞，B 正确；细胞传至 10～50 代左右时，增殖会逐渐缓慢，
甚至于完全停止，且此时部分的细胞核型可能会发生变化，所以
不适宜用于核移植的供体细胞，C 错误；处于减数分裂第二次分
裂中期的次级卵母细胞是核移植的受体细胞，D 错误。
答案：B
10．[2019·陕西长安一中高二期中]动物细胞培养是动物细胞
工程的基础，其培养过程的顺序是( )
①胰蛋白酶处理动物组织，形成分散的悬浮细胞 ②传代培
养 ③定期用胰蛋白酶处理培养细胞，配制成细胞悬浮液 ④原
代培养
A．①②③④ B．①③④②
C．①④②③ D．①④③②
解析：动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础，其培
养过程为：取动物组织块—剪碎组织—用胰蛋白酶处理分散成单
个细胞—制成细胞悬液—转入培养液中(原代培养)—放入二氧化
碳培养箱培养—贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞
悬液—转入培养液(传代培养)—放入二氧化碳培养箱培养，由以上
分析可知，动物细胞培养的顺序为①④③②。
答案：D
基础达标
一、选择题(每小题 5 分，共 60 分)
1．[2019·河北高二期末]下列操作不属于动物细胞培养过程的
是( )
A．胰蛋白酶处理 B．通入一定量的 CO2
C．脱分化处理 D．加入血清或血浆
解析：动物细胞培养过程中，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶
处理动物组织块，将之分散成单个细胞，A 正确；动物细胞培养
需要一定的气体环境，如通入一定量的 CO2 以维持培养液的 pH，
B 正确；植物组织培养技术需要经过脱分化处理，而动物细胞培
养不需要，C 错误；动物细胞培养过程中需要加入血清或血浆等
成分，D 正确。
答案：C
2．[2019·辽源市田家炳高级中学高二期末]下列有关动物细胞
培养的叙述，正确的是( )
A．动物细胞培养前要用胃蛋白酶使细胞分散
B．动物细胞培养的主要目的是获得大量的细胞分泌蛋白
C．细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中
D．动物细胞培养需要无菌、无毒的环境
解析：由于动物细胞之间通过胶原蛋白相连，所以动物细胞
培养前可通过胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使细胞分散，A 错误；
动物细胞培养目的多种，如获得大量健康细胞和检测有毒物质，
并不只是获得大量的细胞分泌蛋白，B 错误；细胞遗传物质的改
变发生于传代培养过程中，C 错误；动物细胞培养需要无菌、无
毒的环境，营养物质充足，气体环境、温度，pH 适宜等条件，D
正确。
答案：D
3．[2019·福建省泉州市泉港区第一中学高二期末]我国科学家
以雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体，成功克隆出两只猕猴，成
为全球首例细胞克隆灵长类动物。下列有关叙述，错误的是( )
A．培育出的两只猕猴均为雌性
B．若取猕猴的体细胞核进行克隆则难度明显较高
C．这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性
D．克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供可
能
解析：培育出的两只猕猴以雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供
体，故均为雌性，A 正确；体细胞分化程度高，恢复其全能性相
对较难，故取猕猴的体细胞核进行克隆则难度明显较高，B 正确；
核移植只能证明高度分化的动物体细胞的细胞核具有全能性，C
错误；克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供可
能，即通过核移植获得模型动物，D 正确。
答案：C
4．[2019·阿城区第二中学高二期中]动物细胞培养过程的顺序
是( )
①原代培养 ②传代培养 ③胰蛋白酶处理组织，形成分散
的悬浮液
A．①②③ B．①③②
C．②③① D．③①②
解析：动物细胞培养时，首先从动物机体取出相关的组织，
用胰蛋白酶处理制成细胞悬液；再将细胞悬液接入培养瓶中，进
行原代培养；贴满瓶壁的细胞再用胰蛋白酶处理，再分瓶进行传
代培养。综上所述，ABC 不符合题意，D 符合题意。
答案：D
5．下列有关核移植的叙述中，错误的是( )
A．卵母细胞最好选择减数第一次分裂中期的卵母细胞
B．胚胎核移植难度明显低于体细胞核移植
C．供体细胞应选择传代 10 代以内的细胞
D．用核移植得到的动物称为克隆动物
解析：因为 MⅡ中期的卵母细胞中含有促进供体核表达全能
性的物质，即成熟促进因子(MPF)，而且活性很高，所以卵母细胞
最好选择减数第二次分裂中期的卵母细胞，A 错误；哺乳动物核
移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，由于胚胎细胞的全能
性高于体细胞，所以动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎核移
植，B 正确；10 代以后的细胞遗传物质可能发生突变(或保证供体
细胞正常的遗传基础)，因此一般选用传代 10 代以内的细胞应用于
核移植的供体细胞，C 正确；用核移植得到的动物称为克隆动物，
D 正确。
答案：A
6．[2019·黑龙江哈尔滨三中高二期中]下列关于克隆的说法，
不正确的是( )
A．由一个受精卵发育为一个完整的个体叫做克隆
B．基因克隆是指某目的基因的复制过程
C．动物体细胞核移植技术需通过细胞核移植形成重组细胞
D．动物克隆的技术基础是动物细胞的培养
解析：由一个受精卵发育为一个完整的个体的过程叫做胚胎
发育，不叫克隆，A 错误；基因克隆是指某目的基因的复制，B
正确；动物体细胞克隆要通过细胞核移植形成重组细胞，进而形
成克隆动物，故 C 正确；动物细胞培养是动物细胞工程的基础，
D 正确。
答案：A
7．[2019·陕西渭南市尚德中学高二期中]下列关于动物细胞培
养的叙述，不正确的是( )
A．培养至细胞发生接触抑制时，瓶壁上的细胞呈单层分布
B．在细胞培养过程中，有部分细胞的基因型会发生改变
C．骨髓瘤细胞的传代培养次数通常不是无限的
D．传代培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
解析：由于接触抑制，动物细胞培养时只能形成单层细胞，A
正确；在细胞培养的传代培养过程中，有部分细胞的遗传物质发
生了改变，因此基因型会发生改变，B 正确；骨髓瘤细胞是癌细
胞，具有无限增殖的特点，C 错误；传代培养时，需用胰蛋白酶
或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞，D 正确。
答案：C
8．[2019·湖北高二期中]一般来说，动物细胞体外培养需要满
足以下条件( )
①无毒的环境 ②无菌的环境 ③固体培养基 ④温度与动
物体温相近 ⑤需要 O2，不需要 CO2 ⑥CO2 能调节培养液 pH
A．①②④⑤ B．①②③④
C．①③⑤⑥ D．①②④⑥
解析：①动物细胞培养需要无毒环境，①正确；②动物细胞
培养需要无菌环境，②正确；③用于动物细胞培养的合成培养基
是液体培养基，需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量
元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，③错误；④动物细胞
培养需要适宜的温度和 pH，其中温度要与动物体温相近，④正确；
⑤动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和 5%的 CO2，⑤
错误；⑥5%的 CO2 能调节培养液的 pH，⑥正确；故正确的有
①②④⑥，D 正确。
答案：D
9．[2019·黑龙江哈尔滨市第六中学校高二期中]一只羊的卵细
胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，
再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技
术具有多种用途，但是不能( )
A．有选择地繁殖某一性别的家畜
B．繁殖家畜中的优良个体
C．用于保存物种
D．改变动物的细胞核基因型
解析：克隆可以有选择地繁殖某一性别的家畜，A 不符题意；
克隆技术可以促进优良畜群繁育，B 不符题意；克隆动物可应用
于濒危物种的保护，C 不符题意；克隆动物的基因型与核供体相
同，故不能改变动物的细胞核基因型，D 正确。
答案：D
10．[2019·河南省实验中学高二期中]通过体细胞核移植技术
培育克隆牛的过程中，未涉及的操作是( )
A．用显微操作技术去除细胞核和极体
B．将精子和卵细胞放在受精溶液中
C．用物理或化学方法激活重组细胞，使其完成发育进程
D．选择合适时期的胚胎进行移植，使其发育成完整个体
解析：核移植中用显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和极
体，A 正确；核移植中未经过精子和卵细胞的结合，B 错误；核
移植过程中用物理或化学方法激活重组细胞，使其完成分裂和发
育进程，C 正确；选择桑椹胚或囊胚期的胚胎进行移植，使其发
育成完整个体，D 正确。
答案：B
11．[2019·福建厦门一中高二月考]下列哪项不属于体细胞核
移植技术的应用范畴( )
A．保护濒危物种
B．大量产生紫杉醇
C．获得组织器官异体移植的供体
D．加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育
解析：在保护濒危物种方面，利用体细胞核移植技术可增加
这些动物的存活数量，A 正确；大量产生紫杉醇利用的技术是植
物组织培养，B 错误；在治疗人类疾病时，转基因动物细胞、组
织和器官可作为异体移植的供体，C 正确；利用体细胞核移植技
术可加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育，D 正确。
答案：B
12．[2019·河北高二月考]下列有关核移植的说法，正确的是
( )
A．克隆动物与核供体动物性状完全相同
B．核移植得到的克隆动物一般不存在健康问题
C．利用动物体细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的动
物个体
D．核移植过程中的受体细胞最好是受精卵
解析：克隆动物的细胞核基因来自提供细胞核的生物，而细
胞质基因来自提供细胞质的生物，因此其表现出的性状与供核动
物不完全相同，A 错误；克隆技术并没有完全成熟，大多数克隆
动物还存在一些遗传和生理缺陷类的健康问题，B 错误；动物体
细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的动物个体，C 正确；
因为 MⅡ期的卵母细胞中含有促进供体核表达全能性的物质，即
成熟促进因子(MPF)，而且活性很高，所以体细胞核移植过程中通
常采用 MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞，D 错误。
答案：C
二、非选择题(40 分)
13．(14 分)下图为动物细胞培养的基本过程示意图，回答下
列问题：
(1)容器 A 中放入的一般是幼龄动物的器官或组织，D 原因是
其 细 胞 ________ 、 易 于 培 养 。 培 养 时 先 要 剪 碎 ， 然 后 用
________________分散细胞，制成 B 瓶中的细胞悬液。将细胞悬
液转入 C 瓶中进行的初次培养称为________。
(2)在 D 瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞绝大部分死亡，
只有极少数细胞存活并可无限增殖，这样的细胞系被称为
________，它们大多数具有________核型。
(3)为保证无菌、无毒的环境，B、C、D 瓶中的培养基中需要
添加一定量的________________；还需要提供 O2 和 CO2 等气体环
境，CO2 的作用主要是________。
(4)动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的
某些物质。下图表示血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结
果。据图可知，培养________________细胞一定需要添加血清。
解析：(1)动物细胞培养是利用细胞增殖以获取大量动物细胞
的技术。幼龄动物的器官或组织中的细胞分裂能力强，适宜培养；
胰蛋白酶处理可去除细胞粘连蛋白，使细胞分散开来；从机体中
取出的细胞经分散处理后立即进行的培养称为原代培养。(2)能够
连续培养下去的细胞系称为连续细胞系；连续细胞系被认为是发
生了转化的细胞系，大多数具有异倍体核型。(3)加入一定量的抗
生素可杀灭病菌，防止对动物细胞的生长增殖造成影响；CO2 的
作用主要是维持动物细胞正常生长所需培养液的 pH。(4)图中实验
结果可知，是否添加血清对癌细胞的数量影响不大，但明显影响
正常细胞的数量，故正常细胞培养过程一定要添加血清。
答案：(1)分裂能力强 胰蛋白酶 原代培养
(2)连续细胞系 异倍体
(3)抗生素 维持培养液的 pH
(4)正常
14．(12 分)[2019·福建高二期中]某研究小组进行药物试验时，
以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养
的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细
胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培
养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比
乙细胞数量________(多或少)。
(2)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长停
止。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细
胞可以传代的次数更________。若用动物的肝脏组织块制备肝细
胞悬液，需用__________处理。
(3)为了防止基因培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入
适量的________。
(4)已知癌基因 X 过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验
一种抗肿瘤药物 Y 对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为 A、B
两组，A 组细胞培养液中加入________，B 组细胞培养液中加入
无菌生理盐水，经培养后，从 A、B 两组收集等量细胞，通过分
别检验 X 基因在 A、B 两组细胞中的________或蛋白质合成水平
的差异，确定 Y 的药效。
解析：(1)肝肿瘤细胞比正常肝细胞的分裂能力强，细胞周期
短，因此在其他条件相同时，相同时间内肝肿瘤细胞产生的子代
细胞多。(2)甲细胞为肿瘤细胞，已经失去接触抑制，而乙细胞为
正常肝细胞，存在接触抑制，因此在这两种细胞生长过程中，当
乙细胞铺满瓶壁时，其生长停止。甲细胞能无限增殖，因此其传
代的次数比乙多。胰蛋白酶能消化组织细胞间的蛋白质，使组织
细胞分散成单个细胞。(3)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，
可向培养液中加入适量的抗生素。(4)该实验的目的是试验一种抗
肿瘤药物 Y 对甲细胞生长的影响，因此自变量为是否加入 Y，B
组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水，则 A 组细胞培养液中应
加入等量 Y。已知基因 X 表达与肝肿瘤的发生密切相关，而基因
X 的表达包括转录和翻译两个步骤，抗癌药物 Y 的作用可能是抑
制基因 X 的转录过程，也可能是抑制其翻译过程，因此通过分别
检测基因 X 在 A、B 两组细胞中的 mRNA 或相关蛋白质合成水平
的差异，可以确定 Y 的药效。
答案：(1)多
(2)多 胰蛋白酶
(3)抗生素
(4)药物 Y mRNA
15．(14 分)[2019·信阳市第一高级中学高二期中]图甲是动物
细胞培养的过程图，图乙是克隆羊培育过程示意图，请据图回答
下列问题：
(1)图甲中容器 A 中的是动物器官或组织，它一般取自
________________。
(2)对于容器 A 中的动物器官或组织，首先要进行的处理是
________，然后用________酶处理，目的是为了使细胞分散开来。
(3)培养首先在 C 瓶中进行，悬液中分散的细胞很快就贴附在
瓶壁上，称为________________。
(4)细胞正常培养了一段时间后，发现细胞绝大部分死亡，只
有 极 少 数 细 胞 存 活 ， 这 是 因 为 存 活 的 细 胞 发 生 了
________________，可无限增殖。目前使用的或冷冻保存的正常
细 胞 通 常 为 ________ 代 以 内 ， 以 保 持 细 胞 正 常 的
________________核型。
(5)图乙核移植时受体应选用________期的卵母细胞。
(6)在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的
成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞
核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能
是( )
A．卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达
B．卵细胞含有的营养物质多
C．卵细胞大，便于操作
D．重组细胞才具有全能性
解析：(1)对动物细胞进行培养时，一般选择胚胎或幼龄动物
的器官或组织，因为代谢旺盛，更容易培养。(2)对于获得的器官
或组织，首先要进行剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时
间，将组织分散成单个细胞。(3)培养的过程中，悬浮液中的细胞
很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。(4)随着培养时间的延长，
大多细胞会死亡，少数因发生基因突变获得不死性，可以无限增
殖。目前使用的正常细胞通常为 10 代以内的细胞，可以保持正常
的二倍体核型。(5)乙核移植时应该选择减数第二次分裂的中期的
卵母细胞，卵母细胞体积大，易操作，含有促进细胞核全能性表
达的物质。(6)在目前现有技术条件下，必须将体细胞的细胞核移
植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，可能是因为卵细胞细胞
质可使体细胞核全能性得到表达。故选 A。
答案：(1)胚胎或幼龄动物的器官或组织
(2)剪碎组织 胰蛋白
(3)细胞贴壁
(4)突变 10 二倍体
(5)减二中(MⅡ中)
(6)A