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- 2021-05-21 发布
专题 5 DNA 和蛋白质技术
课题 1 DNA 的粗提取与鉴定
一、选择题
1.(2019·南通期中)在提取花椰菜的 DNA 时,加入洗涤剂的目的是( )
A.破坏细胞膜 B.破坏叶绿素
C.破坏细胞壁 D.破坏 DNA
解析:选 A 在提取花椰菜的 DNA 时,加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜,
从而释放出 DNA。
2.为了纯化提取的 DNA,可直接在滤液中加入下列哪种物质,反应 10~
15 min,以达到实验目的( )
A.嫩肉粉 B.蒸馏水
C.2 mol/L NaCl 溶液 D.酒精
解析:选 A 嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,能催化蛋白质水解,从而去除滤液
中的部分杂质。
3.对利用新鲜的菜花进行“DNA 的粗提取与鉴定”实验,有关说法正确的
是( )
A.向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核 DNA
B.加入洗涤剂的作用是瓦解细胞膜并溶解 DNA
C.利用 DNA 在不同浓度 NaCl 中溶解度不同可粗提取 DNA
D.含 DNA 的氯化钠溶液与二苯胺在常温下混合呈蓝色
解析:选 C 菜花细胞为植物细胞,有细胞壁保护,因此加蒸馏水不会吸水
涨破,A 项错误;加入洗涤剂的作用是瓦解细胞膜,但不能溶解 DNA,B 项错
误;利用 DNA 在不同浓度 NaCl 中溶解度不同可粗提取 DNA,C 项正确;含 DNA
的氯化钠溶液与二苯胺在沸水浴下混合呈蓝色,D 项错误。
4.下列有关“DNA 的粗提取与鉴定”实验的叙述,错误的是( )
A.DNA 既溶于 2 mol/L 的 NaCl 溶液也溶于蒸馏水
B.向鸡血细胞液中加蒸馏水是为了释放出 DNA
C.向溶解 DNA 的浓盐溶液中加蒸馏水是为了析出 DNA
D.用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤不变
解析:选 D 菜花是植物,用菜花细胞提取 DNA 时需要先用洗涤剂溶解细
胞膜,因此实验操作步骤与以鸡血为材料时不同。
5.下列有关 DNA 的特性的描述,错误的是( )
A.蛋白酶不能水解 DNA,这体现了酶的专一性
B.大多数 DNA 不能忍受 60~80 ℃的高温
C.洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对 DNA 没有影响
D.DNA 不溶于酒精溶液
解析:选 B 蛋白酶能水解蛋白质,但对 DNA 没有影响,这体现了酶的专
一性,A 正确;大多数蛋白质不能忍受 60~80 ℃的高温,而 DNA 在 80 ℃以上
才会变性,B 错误;洗涤剂不会影响 DNA,但能够瓦解细胞膜,C 正确;DNA
不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液,利用这一原理,可
以将 DNA 与蛋白质进一步分离,D 正确。
6.(2019·株洲期末)下列操作对 DNA 提取量影响较小的是( )
A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,释放出 DNA 等核物质
B.加入冷酒精后搅拌时,用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动
C.在析出 DNA 黏稠物时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中黏稠物不再增多
D.在用酒精沉淀 DNA 时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷
却
解析:选 B A 项的做法可以充分释放出核中的 DNA 分子,使进入滤液中
的 DNA 的量尽量多一些;C 项和 D 项的做法可以让 DNA 充分沉淀,保证 DNA
的量;B 项所述的操作可以保证 DNA 分子的完整性,但对 DNA 提取量影响较
小。
7.以鸡血细胞为材料对 DNA 的粗提取和鉴定中有三次过滤,下列说法中
正确的是( )
A.第一次过滤取的是滤布上的残留物(滤渣)
B.第二次过滤取的是滤布上的残留物(滤渣)
C.第三次过滤取的是滤液
D.A、B、C 均不正确
解析:选 D 第一次过滤是用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液,DNA 在滤液中;
第二次过滤是用 2 mol/L 的 NaCl 充分溶解的 DNA,取的是滤液;第三次过滤是
用 0.14 mol/L 的 NaCl 析出的 DNA,DNA 留在纱布上,取的是纱布上的黏稠物。
8.(2019·盐城模拟)在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中,以下操作步骤错误
的是( )
A.将鸡血细胞置于蒸馏水中并用玻璃棒快速搅拌释放出 DNA 等核物质
B.在 DNA 析出和再溶解过程中要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动
C.在用酒精析出 DNA 时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷
却
D.鉴定 DNA 时,需要将甲基绿试剂加入含 DNA 的溶液中并进行水浴加热
解析:选 D 将鸡血细胞置于蒸馏水中并用玻璃棒快速搅拌有利于细胞吸水
涨破,释放出 DNA 等核物质,A 项正确;在 DNA 析出和再溶解过程中要用玻
璃棒沿一个方向轻缓搅动,防止 DNA 链断裂,B 项正确;在用酒精析出 DNA
时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却,C 项正确;鉴定 DNA 时,
需要将二苯胺试剂加入含 DNA 的溶液中并进行沸水浴加热,D 项错误。
9.下列有关 DNA 和蛋白质的溶解性的说法,不正确的是( )
A.DNA 能够溶解在氯化钠溶液中,但不能溶解于酒精溶液中
B.蛋白质能够溶解在酒精溶液中,但不能溶解于氯化钠溶液中
C.用蒸馏水将 2 mol/L 的氯化钠溶液调至 0.14 mol/L,能够析出的物质是
DNA
D.提取较纯净的 DNA 时所用的试剂是冷却的体积分数为 95%的酒精溶液
解析:选 B DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中溶解度
不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使 DNA 充分溶解,而使蛋白质等
杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的,A 正确,B 错误;在物质的量浓度为
0.14 mol/L 的氯化钠溶液中,DNA 析出而蛋白质溶解,所以用蒸馏水将 2 mol/L
的氯化钠溶液调至 0.14 mol/L,能够析出的物质是 DNA,C 正确;DNA 不溶于
酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,利用这一原理,可以将 DNA
与蛋白质进一步地分离,D 正确。
10.图 1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图,
下列叙述不正确的是( )
A.图 1、2 中加入蒸馏水稀释的目的相同
B.图 1 中完成过滤之后保留滤液
C.图 2 中完成过滤之后弃去滤液
D.在图 1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质
解析:选 A 图 1 中加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破,图 2 中加入
蒸馏水的目的是调节盐溶液的浓度,使 DNA 析出;图 1 中鸡血细胞破裂后 DNA
存在于滤液中;图 2 中析出的 DNA 在纱布上,应弃去滤液;嫩肉粉中含有木瓜
蛋白酶,能使杂质蛋白分解。
11.下图是利用鸡血粗提取 DNA 的基本操作,下表中操作目的不能实现的
是( )
选项 烧杯甲中的试剂 烧杯乙中的液体或物质 操作目的
A 蒸馏水 鸡血细胞液 使鸡血细胞吸水涨破
B 蒸馏水
含 DNA 的浓
NaCl 溶液
除去不溶于低浓度 NaCl
溶液中的杂质
C 冷却的酒精 含 DNA 的浓 NaCl 溶液 除去溶于酒精中的杂质
D 2 mol/L NaCl 溶液 纱布上的黏稠物
除去不溶于 2 mol/LNaCl
溶液中的杂质
解析:选 B 在 DNA 粗提取实验中,鸡血中加入蒸馏水的目的是使血细胞
吸水涨破,A 项正确;将烧杯甲中的蒸馏水加入到含 DNA 的浓 NaCl 溶液(2 mol/L)
的烧杯乙中,其目的是使 NaCl 溶液的浓度降低至 0.14 mol/L,此时 DNA 在 NaCl
溶液中的溶解度最小,从而使 DNA 析出,B 项错误;DNA 不溶于酒精溶液,细
胞中的某些蛋白质可溶于酒精,因此,将冷却的酒精加入到含 DNA 的浓 NaCl
溶液中,可除去溶于酒精中的杂质,C 项正确;将烧杯甲中的 2 mol/L 的 NaCl
溶液加入到烧杯乙中,纱布上的黏稠物中的 DNA 会溶解在 2 mol/L 的 NaCl 溶液
中,可除去不溶于 2 mol/L 的 NaCl 溶液中的杂质,D 项正确。
12.(2019·长沙模拟)下表有关“DNA 的粗提取与鉴定”的操作中所选取的
试剂,不正确的是( )
选项 相关操作 选取的试剂
A 破碎鸡血细胞 蒸馏水
B 溶解核内 DNA 物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液
C 提取含杂质较少的 DNA 冷却的体积分数为 95%的酒精
D DNA 的鉴定 双缩脲试剂
解析:选 D 破碎鸡血细胞的方法是用蒸馏水使其吸水涨破;加入物质的量
浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液,其目的是溶解 DNA,过滤除去不溶的杂质;加入
冷却的体积分数为 95%的酒精,目的是使 DNA 析出,提取含杂质较少的 DNA;
DNA 的鉴定需要加入二苯胺(沸水浴),DNA 被染成蓝色。
二、非选择题
13.(2019·济南模拟)DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随着 NaCl 溶液浓度的变
化而变化。
(1)下列 NaCl 溶液的浓度中,能使 DNA 析出最彻底的一种是________,DNA
溶解度最高的一种是________(填选项字母)。
A.0.14 mol/L B.2 mol/L
C.0.15 mol/L D.0.3 mol/L
(2)DNA 不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液,利用
这一原理可以________,溶于酒精中的物质可能有_____________________。
(3)利用 DNA 遇________呈蓝色的特性,将该物质作为鉴定 DNA 的试剂。
其实验过程要点是向盛有________的试管中加入 4 mL 的____________;混合均
匀后,将试管置于____________5 min,待试管________后,观察试管中溶液颜
色的变化。这个实验也说明 DNA 耐________温。
解析:根据实验原理可知,DNA 在浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度
最低,在浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最高。DNA 存在于染色体上,为
了把 DNA 与其他物质分开,利用 DNA 不溶于酒精的原理,除去杂质。利用 DNA
遇二苯胺(沸水浴)呈蓝色的特性,可以鉴定提取 DNA。
答案:(1)A B (2)除去杂质 某些脂类、蛋白质、糖类或其他大分子物质
(3)二苯胺 DNA 二苯胺试剂 沸水中加热 冷却 高
14.在“DNA 的粗提取和鉴定”实验中,A、B、C、D 四个小组分别选择
不同材料进行实验,表中①~⑥表示不同的操作,请分析回答:
组别 材料选择 提取核物质 纯化 DNA 鉴定 DNA
A 鸡血 ①
B 洋葱 ②
C 猪血 ③
D 猪肝 ④ ⑤ ⑥
(1)实验材料选择错误的组别是________,其原因是__________________
__________________________________________________________________。
鸡血是理想的实验材料,理由是__________________________________。
(2)简要说明①操作的基本过程:_________________________________。
(3)下列是⑤操作的两个方案,请分析其原理。
方案一:直接在滤液中加入嫩肉粉,反应 10~15 min。
原理:_________________________________________________________。
方案二:将滤液放在 60~75 ℃的恒温水浴箱中保温 10~15 min,注意严格
控制温度范围。
原理:_________________________________________________________。
(4)⑥过程需要用到的试剂是____________。
解析:(1)哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和细胞器,不含 DNA,不适
合作为本实验的材料;鸡血细胞中 DNA 含量丰富,材料易得,鸡血细胞极易吸
水涨破,是理想的实验材料。(2)提取核物质的基本操作是:先加入一定量的蒸
馏水,同时用玻璃棒搅拌,让红细胞吸水涨破,再过滤收集滤液即可。(3)嫩肉
粉中含蛋白酶,能分解蛋白质,不分解 DNA,从而纯化 DNA;DNA 和蛋白质
对高温耐受性不同,在 60~75 ℃的条件下,蛋白质变性,而 DNA 不受影响,
从而将蛋白质与 DNA 分开。(4)在沸水浴条件下,DNA 与二苯胺反应呈现蓝色,
因此,二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂。
答案:(1)C 哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和细胞器,不含 DNA 鸡
血细胞中 DNA 含量丰富,材料易得;鸡血细胞极易吸水涨破 (2)先加入一定量
的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可 (3)嫩肉粉中的木瓜蛋白
酶能分解蛋白质,而对 DNA 无影响,从而除去蛋白质杂质 DNA 和蛋白质对高
温耐受性不同,60~75 ℃的高温使蛋白质变性,而 DNA 不受影响,从而将 DNA
与蛋白质分开 (4)二苯胺试剂
15.(2019·珠海模拟)回答下列有关“DNA 的粗提取与鉴定”实验的问题:
(1)由于鸡血较难找到,某学生试图用人血代替,结果没有成功,其原因最
可能是________。
A.操作方法不对 B.人血含 DNA 太少
C.NaCl 溶液浓度太高 D.加二苯胺太少
(2)如图为 DNA 粗提取实验过程中的一些重要操作示意图:
①正确的操作顺序是____________________________________________。
②图中步骤 C、E 都加入蒸馏水,但它们的目的不同,分别是___________
和_____________________。
③图中步骤 A 中所用的酒精必须经过______________才能使用,该步骤的
目的是_________________________________________________。
④为鉴定步骤 A 中所得到的丝状物的主要成分为 DNA,可向溶解有该丝状
物的 NaCl 溶液中滴加________试剂,沸水浴,如果溶液变________,则说明该
丝状物的主要成分为 DNA。
解析:(1)DNA 主要存在于细胞核中,鸡血细胞有大量 DNA;而人血的红细
胞中没有细胞核,只有白细胞有细胞核,而且数量很少,所以用人血做实验材料
很难提取到 DNA。(2)DNA 粗提取的过程:鸡血细胞 ――→加蒸馏水涨破后过滤―→用
2 mol/L 的 NaCl 溶液溶解―→过滤除去不溶杂质 ――→加蒸馏水析出含 DNA 的黏稠物
―→过滤―→黏稠物溶解在 2 mol/L 的 NaCl 溶液中―→过滤―→溶于 95%的酒精
中进一步提纯。根据图示及以上分析,正确的操作顺序为 C→B→E→D→A。
答案:(1)B (2)①C→B→E→D→A ②加速鸡血细胞的破裂 降低 NaCl
溶液的浓度,使 DNA 析出 ③充分预冷处理 提取含杂质较少(或较纯净)的
DNA ④二苯胺 蓝色