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- 2021-05-19 发布
[基础对点]
知识点一 基因工程概念及工具酶
1.下列叙述符合基因工程概念的是( )
A.加热杀死的 S 型细菌和活的 R 型细菌一起培养得到活的 S 型细菌
B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌
株
C.用紫外线照射青霉菌,使其 DNA 发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌
株
D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其 DNA 整合到细菌 DNA 上
答案 B
解析 基因工程又叫 DNA 重组技术,是一种人为的操作过程。A 项属于基因
重组,但由于 S 型细菌的基因不是人为导入 R 型细菌的,故不属于基因工程的范
畴,不符合题意;B 项符合基因工程的概念,符合题意;C 项属于诱变育种,不符
合题意;D 项外源基因导入细菌不是人为操作的,不属于基因工程的范畴,不符
合题意。
2.下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述,正确的是( )
A.限制性核酸内切酶只能识别 6 个或 8 个脱氧核苷酸组成的序列
B.限制性核酸内切酶的活性受温度的影响
C.限制性核酸内切酶能识别和切割 RNA
D.限制性核酸内切酶只能从原核生物中提取
答案 B
解析 限制性核酸内切酶能够识别并切割双链 DNA 上特定的核苷酸序列,大
多数限制性核酸内切酶能够识别 6 个核苷酸组成的序列,少数可以识别 4、5 或者
8 个核苷酸组成的序列,A 错误;限制性核酸内切酶的化学本质是蛋白质,活性受
温度影响,B 正确;限制性核酸内切酶只能识别和切割 DNA,C 错误;限制性核
酸内切酶主要从原核生物获得,D 错误。
3.下面是 4 种限制酶所识别的 DNA 分子序列和切割位点图(↓表示切割位点,
切口为黏性末端):
限制酶 1:—↓GATC—
限制酶 2:—CATG↓—
限制酶 3:—G↓GATCC—
限制酶 4:—CCGC↓GG—
请指出下列哪组表达正确( )
A.限制酶 1 和 3 切出的黏性末端相同
B.限制酶 1、2、4 识别的序列都由 4 个脱氧核苷酸组成
C.在使用限制酶的同时还需要解旋酶
D.限制酶 1 和 2 切出的 DNA 片段可通过 T4DNA 连接酶拼接
答案 A
解析
4.下列有关 DNA 连接酶的说法,正确的是( )
A.DNA 连接酶和限制酶的作用恰好相反,DNA 连接酶可以将限制酶切开的
双链 DNA 片段“缝合”起来
B.DNA 连接酶和 DNA 聚合酶一样能连接单链 DNA 片段
C.E·coli DNA 连接酶可以连接有平末端的 DNA 片段,也能连接有黏性末端
的 DNA 片段
D.T4DNA 连接酶只能连接有平末端的 DNA 片段
答案 A
解析 DNA 连接酶不能连接单链 DNA 片段,DNA 聚合酶是将单个脱氧核苷
酸加到已有的核苷酸片段上,B 错误;E·coli DNA 连接酶只能连接有黏性末端的
DNA 片段,C 错误;T4DNA 连接酶既可以连接有黏性末端的 DNA 片段,也可以
连接有平末端的 DNA 片段,D 错误。
5.如图为 DNA 分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次表示限制酶、
DNA 聚合酶、DNA 连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( )
A.①②③④ B.①②④③
C.①④②③ D.①④③②
答案 C
解析 限制酶能够识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条
链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,因此①符合;DNA 聚合酶用
于 DNA 分子的复制,能在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来,因此④符合;DNA
连接酶能在具有相同末端的两个 DNA 片段之间形成磷酸二酯键,将切开的双链
DNA 片段“缝合”起来,因此②符合;解旋酶能够将 DNA 分子的双螺旋解开,
因此③符合,C 正确。
6.关于下图所示黏性末端的叙述,正确的是( )
A.①与③是由相同限制酶切割产生的
B.DNA 连接酶可催化①与③的连接
C.经酶切形成④需要脱去 2 分子水
D.DNA 连接酶与 DNA 聚合酶均能作用于上述黏性末端
答案 B
解析 ①与③的黏性末端相同,但它们识别的碱基序列不同,应不是相同的
限制性核酸内切酶切出来的,A 错误;酶切获得④需要消耗 2 个水分子,C 错误;
DNA 聚合酶作用于单个游离的脱氧核苷酸,D 错误。
知识点二 基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
7.下列有关细菌质粒的叙述,正确的是( )
A.质粒是存在于细菌细胞中的一种颗粒状的细胞器
B.质粒是细菌细胞中能自我复制的小型环状 DNA 分子
C.质粒只有在进入受体细胞后在宿主细胞内才能复制
D.细菌质粒的复制过程一定是在受体细胞外独立进行
答案 B
解析 质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状 DNA 分子,不是细胞器,
在受体细胞内外均可复制,A、C、D 错误,B 正确。
8.质粒是基因工程最常用的载体,下列有关质粒的说法错误的是( )
A.质粒不仅存在于细菌中,某些病毒也具有
B.质粒作为载体时,应具有标记基因和多个限制酶切点
C.质粒可将目的基因整合到染色体 DNA 上
D.质粒能够在宿主细胞中稳定保存,并在宿主细胞内复制
答案 A
解析 质粒为小型环状 DNA 分子,不仅存在于细菌中,也存在于某些真核生
物中,但病毒中没有质粒,A 错误;质粒作为载体时,应具有标记基因和多个限
制酶切割位点,B 正确;质粒携带目的基因进入细胞后,进行自主复制,或将目的
基因整合到受体细胞染色体 DNA 上,C 正确;质粒能够在宿主细胞中稳定保存,
并在宿主细胞内复制,D 正确。
9 . 限 制 酶 MunⅠ 和 限 制 酶 EcoRⅠ 的 识 别 序 列 及 切 割 位 点 分 别 是
—C↓TTAAG—和—G↓AATTC—。如图表示四种质粒和目的基因,其中,质粒上
箭头所指部位为酶的识别位点,阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因
载体的质粒是( )
答案 A
解析 用限制酶 MunⅠ 切割 A 质粒后,不会破坏标记基因,而且还能产生与
目的基因两侧黏性末端相同的末端,适于作为目的基因的载体,A 正确;B 项中质
粒没有标记基因,不适于作为目的基因的载体,B 错误;C、D 质粒含有标记基因,
但用限制酶切割后,标记基因会被破坏,因此不适于作为目的基因的载体,C、D
错误。
[能力提升]
10.下图表示一项重要的生物技术,对图中物质 a、b、c、d 的描述,正确的
是( )
A.通常情况下,a 与 d 需要用同一种限制酶进行切割
B.b 能识别特定的核苷酸序列,并将 A 与 T 之间的氢键切开
C.c 连接双链间的 A 和 T,使黏性末端处碱基互补配对
D.b 代表的是限制性核酸内切酶,c 代表的是 RNA 聚合酶
答案 A
解析 b 是限制性核酸内切酶,能识别特定的核苷酸序列并使 DNA 分子的每
一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,而不是使氢键断开,B
错误;c 是 DNA 连接酶,能连接两个 DNA 片段中的磷酸二酯键,C、D 错误。
11.下列关于如图所示 DNA 分子片段的说法,正确的是( )
A.限制酶可作用于①部位,解旋酶作用于③部位
B.限制酶可作用于③部位,解旋酶作用于①部位
C.作用于①部位的限制酶同时也可以作用于④部位
D.作用于①部位的限制酶与作用于⑤部位的限制酶的碱基识别顺序相反
答案 A
解析 限制酶可作用于①部位磷酸二酯键,解旋酶作用于③部位氢键,A 正
确,B 错误;作用于①部位的限制酶同时也可以作用于⑤部位,C 错误;作用于①
部位的限制酶与作用于⑤部位的限制酶的碱基识别顺序相同,它们识别的序列都
为—GAATTC—,D 错误。
12.基因工程中涉及多种工具酶。限制性核酸内切酶是一类能识别特定核苷
酸序列并在特定位点切割双链 DNA 的“基因剪刀”。被限制酶识别的序列往往正
反读顺序相同,断裂的位置交错,但又是围绕着一个轴线(对称轴)对称排列,如图
1。PstⅠ和 EcoRⅠ都是限制酶。
(1)请补全图 2 中的互补链,画出对称轴以及切割后的产物。
(2)DNA 连接酶是基因操作的“针线”,其作用是把具有________能力而粘贴
在一起但存在的切口封闭,进而才可能形成有意义的________。
(3)逆转录酶也常被用于基因工程,其存在于________(生物)中,催化以
________为模板合成 DNA 的过程。
答案
(2)碱基互补配对 重组 DNA
(3)某些病毒 RNA
解析
(2)DNA 连接酶作用于 DNA 分子断开的磷酸二酯键,把目的基因与载体结合
形成重组 DNA 分子,而两条 DNA 分子之间是通过碱基互补配对形成氢键连在一
起的。
(3)逆转录酶只存在于部分以 RNA 为遗传物质的病毒中,催化反转录过程,即
以 RNA 为模板合成 DNA 的一条链,在 DNA 聚合酶作用下形成双链 DNA。
13.如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图,据图回答下列问题。
(1)a 代表的物质和质粒的化学本质都是__________,二者还具有其他共同点,
如①________________________,②________________(写出两条即可)。
(2)若质粒 DNA 分子的切割末端为—A
—TGCGC
,则与之连接的目的基因切割末
端应为________________;可使用________________把质粒和目的基因连接在一
起。
(3)氨苄青霉素抗性基因在质粒 DNA 上称为________________,其作用是
__________________________________________________________________。
(4)下列常在基因工程中用作载体的是( )
A.苏云金芽孢杆菌的抗虫基因
B.土壤农杆菌中的 RNA 分子
C.大肠杆菌的质粒
D.动物细胞的染色体
答案 (1)DNA 能够自我复制 具有遗传效应
(3)标记基因 供重组 DNA 的鉴定和选择
(4)C
解析 (1)a 代表的物质是拟核中的 DNA 分子,质粒是细胞质中的 DNA 分子,
二者都是环状 DNA 分子、能够自我复制、具有遗传效应、也都具有双螺旋结构等。
(3)质粒上的氨苄青霉素抗性基因是标记基因,可以用作目的基因(重组 DNA)
是否导入的鉴定和筛选。
(4)大肠杆菌的质粒是基因工程中常用的载体。